Liquid Cultures Manual
Liquid Culture spuit is een steriele oplossing waarin levend mycelium zich ontwikkeld en vermenigvuldigd. De vloeistof is water met een voedingsbron zoals honing of light malt extract. Doordat het mycelium al leeft en groeit in de voedingsvloeistof, geniet je van een snelle kolonisatie en een lagere kans op contaminaties. In deze handleiding gaan we ervan uit dat je de liquid culture wilt gebruiken om zelf paddobroed (grain spawn) te maken.
Hoe je zelf graan kan steriliseren om paddo broed te maken wordt uitgebreid toegelicht in de handleiding grain spawn.
Bewaar de liquid culture spuit maximaal 2 maanden, op een koele (4-8 graden Celsius), donkere, schone en droge plek.
Het pakketje is binnen en je wilt aan de slag met je eigen paddobroed. Maar wat heb je daar allemaal voor nodig?
Allereerst een SpaceJars liquid culture spuit. Dit is je bron van schoon mycelium. Het pakketje bevat:
- 1x 20mL liquid culture spuit
- 1x steriele naald
- 2x alcoholdoekje
- Link naar deze handleiding
Daarnaast heb je uiteraard het medium nodig dat je wil inoculeren met je liquid culture. In deze handleiding gaan we ervan uit dat je gesteriliseerd graan wilt inoculeren, en dat je dit al klaar hebt om te gebruiken. Hoe je dit zelf kunt maken lees je in onze handleiding grain spawn. Om een pot met 385mL graan te inoculeren heb je slechts 1-2 mL liquid culture nodig. Met één spuit kun je dus gemakkelijk 10-20 potten gesteriliseerd graan inoculeren. Losse potten die perfect zijn om paddobroed te maken zijn hier verkrijgbaar. Daarnaast heb je nog een aantal artikelen nodig die helpen bij het contaminatievrij inoculeren van je graan:
- 70% IPA
- Nitril handschoentjes (hier verkrijgbaar)
- Mondmasker (hier verkrijgbaar)
- Still Air Box (optioneel)
Omdat je tijdens het inoculeren zo schoon mogelijk wilt werken is een Still Air Box aanbevolen. Als je zorgvuldig en in een schone ruimte werkt is het niet per se nodig, maar het blijft een handige toevoeging. Hoe je goedkoop en gemakkelijk zelf een Still Air Box maakt lees je hier.
Een goede voorbereiding is het halve werk. Volg de onderstaande punten zodat je zeker weet dat je voorbereid aan de slag kan met je liquid culture spuit:
- Zet alles wat je nodig gaat hebben in een schone ruimte waar je het broed wil inoculeren.
- Beperk luchtstromen in deze kamer: geen open deuren/ramen, geen ventilators en geen verwarming.
- Was je handen grondig met zeep, draag een mondkapje en nitril handschoenen.
- Maak je werkruimte schoon met 70% IPA
- Optioneel; bereid het werk in de Still Air Box voor.
- Desinfecteer alles wat je aan gaat raken met 70% IPA
Als je deze punten hebt gevolgd kun je beginnen met het inoculeren van je potten graan.
Inoculeren
Nu is het tijd om het mycelium van de liquid culture spuit in het graan te introduceren. Schud de liquid culture spuit stevig. Dit verspreid het mycelium goed door de vloeistof. Verwijder het afsluitdopje van de spuit, en bevestig de steriele naald. Deze draai je gemakkelijk in de Luer-Lock. Als je gebruik maakt van een zelfhelend injectie punt, desinfecteer deze met 70% IPA. Als je gebruik maakt van polyester vulling is dit niet aan te raden. De kans op contaminaties ligt iets hoger, maar als je de polyester vulling doordrenkt met alcohol gebeurd dit ook. Injecteer 1-2 mL per pot van 385 mL gesteriliseerd graan. Als je klaar bent droog je de naald door deze te verhitten met een aansteker. Plaats het beschermkapje over de naald terug, en bewaar de rest van je liquid culture in een zip-lock bag in de koelkast.
Belangrijk
Gebruik kleine hoeveelheden. Technisch gezien neemt de kolonisatie snelheid toe als je meer liquid culture gebruikt, maar een té vochtig substraat bevorderd de kans op bacteriële contaminaties.
Kolonisatie
Plaats de potten in het donker bij een temperatuur van 25-28 graden Celsius. Na een aantal dagen zul je witte plukjes mycelium zien.
Als ongeveer 30% van het potje doorgroeit is kun je eenmaal goed schudden. Hierdoor breek je de klompjes met mycelium op in kleine stukjes en verspreid het mycelium zich door het substraat. Dit versnelt het koloniseren aanzienlijk.
Uitgebreide informatie over het maken van paddo broed staat in de handleiding Grain Spawn.
